紫外分光光度計通過物質(zhì)在光的照射激發(fā)下，產(chǎn)生了對光的吸收效應(yīng)，物質(zhì)對光的吸收具有選擇性的。各種不同的物質(zhì)都具有各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光通過溶劑時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度與物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系。用于定量時，在吸收波長處測量一定濃度樣品溶液的吸光度，并與一定濃度的對照溶液的吸光度進(jìn)行比較或采用吸收系數(shù)法算出樣品溶液的濃度。
紫外分光光度計使用經(jīng)驗：
1)若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3)比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5)放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
6)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用，否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。
紫外分光光度計應(yīng)用：用作物質(zhì)鑒定、純度檢查，有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。在定量方面，可測定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量，也可以測定物質(zhì)的離解常數(shù)，絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)物質(zhì)分了量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測器等。
